Русскоязычный медицинский портал

 

ГОЛЬДЖИ МЕТОД


104   -

ГОЛЬДЖИ МЕТОД окраски гист. препаратов состоит в том, что небольшой кусочек ткани кладется сначала или в чистый паствор двухромовокислого калия или в одну из смесей, содержащих эту соль, а затем в раствор азотнокислого серебра или сулемы. На структурных элементах выпадает при этом осадок из хромовокислого серебра или ртути, и получается сплошное импрегни-рование их (силуэты клеток и волокна). Применяется Г. м. для выявления нервных клеток и отростков, глиозных клеток, осевых отростков с колятералями и концевыми окончаниями, далее для воспроизведения границ между эпителиальными клетками, для выявления секреторных канальцев, желчных ка-пиляров и пр. Теория метода тщательно разработана и касается разнообразных вопросов. Получаемый осадок не просто состоит из Ag2Cr04, а представляет собой сложное белково-хром-серебр'яное соединение. Динамика процесса выяснена Гофманом и Лизегангом (F. В. Hofmann, Lie-segang). Теория последнего основывается на особенностях циркуляции и перераспределения частиц К2Сг207 и AgN03, а также Ag2Cr04 в коллоидной среде и на том влиянии, которое оказывают при этом на образование осадка кислоты и аммиачные соли тканевых структурных элементов. Почему из целой группы одинаковых нервных клеток импрегнируются только нек-рые, объясняется тем, что осадки легче выпадают на тех структурных элементах, к-рые начали импрегнироваться раньше. Было высказано также мнение, что отложение осадков идет по поверхности клеток и волокон в лимф, пространствах, а не в них самих, но это не соответствует фактам.

Техника метода. Г. предложил несколько модификаций, к-рые приводятся ниже в порядке употребительности.—А. С к о-рый серебряный метод Г. 1) Очень небольшой и тонкий кусочек свежего материала, предпочтительно от эмбриона или новорожденного, кладется в смесь: 3%-ного Kal. bichrom.—8 частей, 1%-ной Ac. osmici— 2 ч. Держать в темноте 2—8 дней. Предварительно кусочек обсушить промокательной бумагой и в жидкости положить тоже на фильтровальную бумагу. Продолжительность фиксации: для невроглии—2—3 дня, для нервных клеток—3—5 дней, для нервных волокон—6—9 дней.Лучше делать пробные срезы через 2—3 дня. 2) Быстро промыть в дестил. воде или в бывшем в употреблении растворе серебра (1/1%-ный Arg. nitr.). 3) 0,6—1%-ный Arg. nitr.—2—6 дней. Менять жидкость, когда желтеет. 4) Резать, зажав кусок в печеночной ткани, или на замораживающем микротоме или после быстрого заключения в целлоидин (30 минут), толстые срезы—в 50—100 ц. 5) Абсолютный спирт, бергамотовое масло, канадский бальзам или даммаровая смола в ксилоле без покровного стекла или же восходящие спирты до 96%, креозот (коротко), бальзам или смола. Дать затвердеть в воздухе.—Б. Длительный серебряный метод Г.

1) Фиксация в Мюллеровской жидкости на холоду 3 мес., затем в тепле—1 мес. (в темной склянке) или для ускорения—в растворе Kalii bichr.,—с 2%-ного постепенно дойти до 5%-ного. 2) Дестилиров. вода (коротко).

3) 0,5—1%-ный Arg. nitr. и далее, как в первой модификации. Можно скомбинировать обе модификации:сначала держать в Мюллеровской жидкости, а потом в смеси двухромовокислого калия с осмиевой кислотой.—

В. С у л е м*о вый метод Г. 1) Мюллеровская жидкость—3—4 недели. 2) 1/4—1%-ный водный раствор сулемы, от недели до 1—2 месяцев. Переменить жидкость в первый день и затем снова, когда начнет желтеть. 3)Спир-ты восходящей крепости, целлоидин, срезы.

4) Дестилированная вода. 5) Срезы на 1— 2 минуты класть в жидкость: a) Natrium hyposulfuricum 175 г, квасцы 20 г. Ammonium sulphocyanid. 10 г, поваренная соль 40 0, дестилированная вода—1.000 куб. см. Дать постоять 8 дней, потом фильтровать, б) Хромистое золото 1 г, дестилированная вода—100 куб. см. Взять 60 частей первой жидкости и 7 второй. Срезы делаются черными. 6) Основательная промывка. 7) Докрасна кармином. 8) Вода. 9) Абсолютный спирт, ксилол, заключение в бальзам.

Из модификаций Г. м. лучшая — Кокса (Сох).—М етод Кокса. 1) Фиксация и импрегнация в жидкости: а)5%-ного Kalii bi-chrom. 20 8, 5%-ной сулемы—20 г, дест. воды 40 куб. см\ б) 5%-ного Kalii chrom.—16 г. Во избежание осадка сначала приготовить жидкость и (можно с подогреванием) и прибавить Kalium chromicum (б). Кусочки (можно и крупные) положить на 2 и более месяца. Летом держать короче. 2) Срезы на замораживающем микротоме. 3) Срезы сбрасываются в 5%-ный Natr. carbon, на 1—2 часа или в насыщенный Natr. sulfurosum, где происходит восстановление. 4) Вода; быстро на стекле—абсол. спирт, масло; осторожно фильтровальная бумага. 5) Заключение в лак: зандарак 75 г, камфора 15 г, терпентин 30 г, лавандовое масло 22,5 г, абсолютный спирт 75 г, касторовое масло 5—10 капель. На затвердевающий слой лака капнуть касторового масла, прикрыть покровным стеклом и выдавить излишнее количество.—Показания к м е т о д у.* Г. м. не элективен, дает осадки, и все же в нек-рых отношениях— для выяснения связи невронов, для обнаружения секреторных канальцев—он почти совершенно незаменим. Из приведенных модификаций длительная—более старая, скорая же—более поздняя и усовершенствованная. Последняя имеет преимущества перед первой. Точно так же ртутные модификации имеют тенденцию вытеснять серебряные. Но в практической деятельности следует пользоваться однако различными модификациями метода Гольджи в зависимости от свойств исследуемого объекта.

Лит.:    I    а    ]    lias    В.,    Golgische Methode (En-

zyklopadie der mikroskop. Technik, hrsg. v. R. Krause, В. II, E.—Wien, 1926, лит.).    П.    Снесарев.

    name:
    send
ТАКЖЕ НА dao-med
f72e2aa373650d944c38b1c8ca875576 0467ccb0286829346e4d1560ef2b3c04 21de8b841f2edeacafb65f278dfd5f07