Русскоязычный медицинский портал

 

ГЕМАТОКСИЛИН


234   -

ГЕМАТОКСИЛИН, красящее вещество, широко применяемое в гистологич. технике. Добывается из экстракта кампешевого дерева | Haematoxylon campechianum (Caesalpi-пасеае), Мексика, Центр. Америка]. Состав— С6Н140„ (Chevreuil, 1810; Erdmann, 1842). Образует бесцветные или желтоватые кристаллы: с 1 молекулой воды—ромбические, с 3 молек. воды-—тетрагональные. В продаже встречаются чаще последние с молек. весом 302+54 = 356 (собств. 355,16). Растворимость: в холодной воде слабая—0,7177 г в 100 куб. см при 15°; в горячей воде, спирте и эфире хорошая. Выше 100° Г. плавится. Вращение плоскости поляризации вправо. В аммиачном растворе Г. окисляется в присутствии О в гематеин по формуле:

(Erdmann, 1842; см. Haematein). Медленное окисление Г. происходит уже при одном

действии О воздуха, что обычно обозначают как «созревание» Г. При действии окислителей (КМп04, K2Cr20„ KJ03, NaJ03, КСЮ3, КСЮ„, KjjSjjOg, Н202 и др.) этот процесс значительно ускоряется, особенно в присутствии каталитических солей Fe, Си, Сг,

V. Для полного окисления 1 а гематоксилина в гематеин требуется 0,177 г марганцовокислого калия.

Механизм окрашивания. Водные и спиртовые растворы Г. (resp. продуктов его окисления) обладают ничтожной красящей способностью и применяются лишь в ботанической цитологии. Окрашивание Г. возможно лишь путем образования т. н. лаков, к-рые оксигематеины образуют с солями разных металлов (Al, Fe, Сг, Си, V и др.). Чем степень окисления Г. выше, тем эти лаки темнее и для целей микроскопии пригоднее. Наилучшие черные лаки получаются с ди-, три- и тетраоксигематеинами. Дальнейшее окисление Г. приводит к образованию бурых лаков, для окраски уже непригодных. Практически наиболее существенны: 1) лаки Г. с различными алюминиевыми квасцами (калийными, аммиачными и др.), 2) лаки Г. с железо-аммиачными квасцами. (Лаки Г. с Сг, Си, Mn, Mo, Р, W, V и другими металлами применяются редко.)

А. Растворы Г. с алюминиевыми квасцами служат для непосредственного (одномоментного) окрашивания. Наиболее употребительны: а) Квасцовый Г. Ганзена (Hansen). Приготовляют растворы: 1) Haematox. puriss. 1 г в 10 куб. см Alcohol 96°; 2) калийных квасцов 20 г в 200 куб. см Aq. dest. Смешивают 1 и 2 и прибавляют

3) 0,18 г КМп04 в 5 куб. см Aq. dest. Кипятят х/г—1 мин., быстро охлаждают. Готовая краска имеет пурпурно-фиолетовый цвет. Сохраняется годами. Перед употреблением фильтровать. Красить срезы, заключать в нейтральный канадский бальзам или в даммаровую смолу. Ядра окрашиваются в сине-фиолетовый—черно-синий, протоплазма—в синеватый—серо-фиолетовый цвет, б) Гемалаун Майера (сш.Наета1аип).в)Ква,с-цовый Г. Эрлиха (Ehrlich); широко применяется в гистологическсй и пато-гистологич. технике. Смешивают: 1 грамм Г. в 50 куб. см Alcohol 96° и насыщенный раствор калийных квасцов в смеси 50 куб. см глицерина и 50 куб. см воды. После смешения прибавляют 5 куб. см Ac. acet. glac. и оставляют «зреть» в открытом сосуде. Готовый раствор темновишневого цвета. Красить неразведен-ным раствором. Ядра фиолетово-красные, г) Квасцовый Г. Делафильда (Delafield) готовится на аммиачных квасцах. Все указанные растворы продаются в готовом виде (Griibler, Leipzig).

Б. Растворы Г. - с железными солями применяются как для одномоментного, так и для двухмоментного окрашивания. а) Из одномоментных способов наиболее распространены: 1)Способ Вей-герта—Г.+КеС1з (Weigert; см. Вейгерта методы окраски). 2) Железо-трио ксигематеи-новый способ Ганзена (1905). Растворяют:

1) Юз жел. квасцов(Ferriammoniumsulfat)+ + 1,4 зсернок. аммония в 150куб. см Aq. d.,

2) 1,6 Haematox. puriss. в 75 куб. см Aq. dest.

при нагревании. После охлаждения приливают раствор 1 к раствору 2. Получается темнофиолетовая жидкость. Кипятят 1 мин., быстро охлаждают; не фильтруя, наливают доверху в бутылку с притертой пробкой. Перед окрашиванием фильтровать. Красить от 1 мин.до24ч. Диференцировать в 2—3%,,-ной H2S04 или 0,5—0,1%-ной СН3СООН. Очень черные тона, резкое окрашивание ядер. Не выцветают.—б) Двухмоментиый способ—железный Г. Гейденгайна (1894). Также основан на образовании лака, по отличается тем, что сначала препарат обрабатывается (протравляется) железной солью, а затем уже окрашивается водным раствором Г. Способ окрашивания: 1. Протрава срезов в 2,5%-ном водном растворе сернокислых железо-аммиачных квасцов (кристаллы фиолетовые, раствор буровато-желтый) 3—12 ч. 2. Окраска 12—24 ч. в водном растворе Г. (4—6-недельн. 0,5%-й раствор Haematoxyl. puriss. в воде; либо Haematoxyl. puriss. 1,0, Ale. 96°—10,0; Aq. dest. 90,0). Совершенно перекрашенные срезы диференцируют под контролем микроскопа в 2,5%-ном растворе желез, квасцов до желаемой степепи, промывают1/;,—1 ч. в проточной воде и заключают в канадский бальзам. Результаты—оттенки черно-синие до серо-черных. Резкое окрашивание ядер, центросом, ресничек и др. клеточных элементов. Дополнительное окрашивание: Eosin, Erythrosin, Rubin S., Chro-motrop, Lichtgrtin.

Окрашивание всеми Г. дает превосходные результаты не только на срезах, но и па тотальных препаратах простейших и свободных клеточных элементов после влажной фиксации. Однако, необходимо помнить, что железный гематоксилин окрашивает в клетке самые разнообразные включения, совершенно несходные по своему хим. составу и морфологическому значению, и потому данные, получаемые при этой окраске, требуют очень осторожной оценки. Цены: Haematoxylin puriss. Юг—27,70 Mark., Нае-matoxylin Bohmer 100 куб. см—1,15 М., Haematoxyl. Delafield 100 куб^см—1,50 М., Haematoxyl. Ehrlich 100 куб. см—2,00 М.

Лит.: Hansen F., H&matoxylin u. Hamatoxy-linfarbungen, EnzyklopSdie d. mikroskopischen Tech-nik, hrsg. v. R. Krause, В. II, p. 958—998, Berlin— Wien, 1926 (лит.).    Г.    Эпштейн.

    name:
    send
ТАКЖЕ НА dao-med
f72e2aa373650d944c38b1c8ca875576 0467ccb0286829346e4d1560ef2b3c04 21de8b841f2edeacafb65f278dfd5f07